农村老熟妇乱子伦视频

<video id="fxlpn"></video>

    <listing id="fxlpn"><font id="fxlpn"></font></listing>
    <sub id="fxlpn"><delect id="fxlpn"><font id="fxlpn"></font></delect></sub>

      <mark id="fxlpn"></mark>
      <delect id="fxlpn"><dfn id="fxlpn"></dfn></delect>
      <address id="fxlpn"></address>

            <sub id="fxlpn"></sub>

            <progress id="fxlpn"><nobr id="fxlpn"><meter id="fxlpn"></meter></nobr></progress>

              <thead id="fxlpn"></thead>

              瓜爾豆膠產品中心 / Product Center

              聯系我們 / Contact

              • 山東東達生物化工有限公司
              • 聯系人:王偉
              • 電 話:0533-8299008
              • 手 機:13280657534
              • 傳 真:0533-8299001
              • 郵 箱:sddaswchina@163.com
              • 網 址:http://www.semangattanpabatas.com/
              • 地 址:山東省淄博市周村區開發區工業園區16號

              酶法制備瓜爾膠半乳甘露低聚糖的研究

              發布日期:2015-02-03 14:27:28
              酶法制備瓜爾膠半乳甘露低聚糖的研究和甘露聚糖酶
              酶法制備瓜爾膠半乳甘露低聚糖的研究
              酶法制備瓜爾膠半乳甘露低聚糖的研究,以瓜爾膠為原料,采用,甘露聚糖酶酶法制備半乳甘 露低聚糖。通過單因素試驗及L9(34)正史試驗對酶解反應 條件進行優化和驗證,結果表明,其最佳反應條件為:瓜爾 膠濃度〇• 5%,加酶責20 IU/g,pH 6. 0,50 °C,反應時間S h。 在此條件下,酶解率為24.2%,平均聚合度為4. 13。采用高 效液相色譜定性分析發現,酶解產物是以二糖為主要成分的 半乳甘露低聚糖。
              聚糖和半乳葡甘露聚糖的主鏈內部隨機切割卩甘露 糖苷鍵的水解酶,簡稱P-甘露聚糖酶(p-manminase)w ,廣泛 存在于動植物和微生物中。據文獻[3]報道,某些植物膠(如 魔芋膠、角ii膠、瓜爾豆膠、田菁膠等)經p•甘露聚糖酶水解 后的產物含有不同單糖分子組成的低聚糖。
              半乳甘露低聚糖(galactomannan-o 丨 igosaccharides,簡稱 GMOS)是低聚糖家族的新成員,是半乳甘露聚糖的不完全 降解產物,它能顯著增進人體腸道內以雙歧桿菌為代表的有 益南的增殖,且具有減少動物腸道病原菌、增強免疫、提高腸 黏膜功能等多種特性目前,在日本已有以瓜兒膠為原 料制備的甘露低聚糖功能食品,但中國多是用魔芋膠制取葡 甘露低聚糖,而且對由瓜爾膠制備半乳甘露低聚糖的研 究較少。隨著瓜爾豆在中國的推廣種植[11],用瓜爾膠為原 料制備半乳甘露低聚糖將會具有重要的現實意義。本試驗 采用甘露聚糖酶對瓜兒膠進行酶解,優化酶法制備半乳甘 露低聚糖的工藝條件,并對酶解產物進行定性檢測,旨在為 產品的工業化生產提供參考。
              1材料與方法
              1.1材料與試劑
              瓜爾膠:廣東大地食用化工有限公司;
              P-甘露聚糖酶:昆明愛科特生物科技有限公司;
              甘露糖、甘露二糖:廣州市齊云生物技術有限公司; 其他試劑均為國產分析純。
              1.2儀器與設備
              定時恒溫磁力攪拌器:90-2型,上海滬西分析儀器有限 公司;
              數字旋轉黏度計:SNB4型,上海恒平科學儀器有限公司; 可見光分光光度計:JH 722S型,上海菁華科技儀器有 限公司;
              高效液相色譜分析儀jhimadzu LC-20AT型,日本島津 公司;
              不差折光檢測器:RII>l〇A型,日本島津公司。
              1.3檢測方法
              1.3.1 p■甘露聚糖酶活力的測定參照文獻[12]。取0.5% 的瓜爾膠溶液(pH 5.0的磷酸氫二鈉一檸橡酸緩沖液配置) 20 mL,加人0.1 mL用pH 5.0緩沖液配置的粗酶液,于 50X:反應30min,用DNS法測還原糖量。在上述試驗條件 下,以每分鐘水解底物產生1 /imol還原糖(以甘露糖計)所 需的酶量定義為一個P-甘露聚糖酶酶活單位(IU/gh 1.3.2黏度測定采用SNB—1數字旋轉黏度計。
              1.3.3瓜爾膠總糖測定準確稱取0.05 g瓜爾膠置于 20 mL具塞試管內,酶法制備瓜爾膠半乳甘露低聚糖的研究,依次加人10 mL水和0.4 mL濃硫酸,于 100 t水解2 h,冷卻后用NaOH中和,然后定容100 mL。 取1. 0 mL用DNS法測定還原糖(以甘露糖計)量,計算總糖 量,總糖含量按公式(1)計箅:
              瓜爾膠總糖含量= =^^^^X100%(1)
              1.3.4瓜爾膠酶解率不同濃度的瓜爾膠溶液中加人一定 活力單位的P-甘露聚糖酶(加酶量以IU/g瓜爾膠計),于不 同溫度下反應一定時間,取樣適當稀釋后用DNS法測定酶 解液中的還原糖(以甘露糖計)量。酶解率按公式(2)計算:
              瓜爾膠酶解率= U^^^X100%(2)
              1.3.5平均聚合度(DP)聚合度為寡糖中組成寡糖的單 糖單位的個數[13]。半乳甘露低聚糖的DP按公式(3)計算:
              平均聚合度(DP) =酶雜雜暈XI。。%(3)
              1.3.6酶解產物高效液相色譜定性檢測酶解液加入2倍 體積的無水乙醇,靜置后離心,取上清液,濃縮,采用高效液 相色譜儀定性分析。色譜條件:色譜柱Kromasil 100-5NH2 (150X4.6 mm),柱溫 40 X:,流速 1 mL/min,進樣量 20 pL, 流動相為乙腈 > 水=70 : 30,示差折光檢測器分析。
              1.4試驗方法
              1.4.1單因素試驗以酶解率和DP為指標,依次分別對加 酶量、底物濃度、酶解溫度.pH值和反應時間進行單因素試 驗。在0.5%的瓜爾膠溶液中分別加人10,15,20,25,30, 40 IU/g的p-甘露聚糖酶,于pH 5. 0,50 t:反應30 min,以確 定最佳加酶鼂;分別配置濃度為〇. 25%、0. 5%,1. 0%、 1,5%、2.0%的瓜爾膠溶液,各加入p-甘露聚糖酶20 IU/g, 于pH 5.0,50 1C反應30 min,以選擇合適的底物濃度;在
              0.5%的瓜爾膠溶液中加人20 IU/g p•甘露聚糖酶,分別在 pH 5.0,溫度分別為 30,40,45,50,55,60,70,80 t:的條件下 反應30 min,以確定合適的反應溫度;分別用pH 4. 0,5. 0, 6.0,7. 0,8. 0的緩沖液配置〇• 5%的瓜爾膠溶液,各加人 2〇 IU/g卩-甘露聚糖酶,于50 *C反應30 min,以選擇最佳 PHUO. 5%的瓜爾膠溶液加人20 IU/g p-甘露聚糖酶, pH 5.0,50 t進行反應,在卜10 h內,每間隔1 h取樣測定 酶解率,以確定合適的酶解反應時間。每個水平重復3次, 測定結果并取平均值。
              1.4.2正交試驗設計由于瓜爾膠酶解過程不僅受加酶 量、底物濃度、溫度、時間、PH等因素影響,而且這些因素還 存在復雜的交互作用,故而設計L9(3<)正交試驗,以確定酶 解瓜爾膠制備半乳甘露低聚糖的最佳條件。
              2結果與分析
              2.1甘露糖標準曲線的繪制
              以甘露糖含量為橫坐標,吸光度為縱坐標做標準曲線 (見圖1),得出回歸方程為:y = 0.012 4 1—0.016,線性相 關系數記=0.998 6。
              圖1甘露糖標準曲線 Figure 1 Standard curve of mannose
              2.2黏度測定
              瓜爾膠酶解前后的黏度變化測定結果見表1。1%的瓜 爾膠黏度為4 294 MPa • s,加人一定量|3-甘露聚糖酶后,在 5 min后,黏度迅速下降,說明p-甘露聚糖酶能很好的降解瓜 爾膠。酶法制備瓜爾膠半乳甘露低聚糖的研究,可利用這種特性,通過補充底物的方式獲得高濃度的 水解液。
              表1酶解過程中瓜爾膠溶液的黏度變化
              Table 1 The change of guar gum's viscosity
              during hydrolysis
              時間黏度AMPa. s-1)時間黏度AMFa • s M
              0 min42942 h3. 334
              5 min6. 6214 h2.944
              10 min4. 7286 h2. 842
              30 min3,5388 h2. 760
              1 h3.371
              2.3瓜爾膠總糖測定
              0.05 g瓜爾膠被濃硫酸水解后中和定容至100 mL,取 lmL測定還原糖量。通過計算測得瓜爾膠總糖含董為 77.1%。
              2.4酶解試驗結果與分析
              通過單因素試驗,分別獲得各因素的最佳試驗結果,即 加酶M20 IU/g、瓜爾膠濃度0.5%、酶解溫度456、
              時間8 h??紤]到高濃度的瓜爾膠因為黏度過大而不利于酶 解反應的進行,故在單因素試驗的基礎上,固定瓜爾膠溶液。
              濃度為03%,選擇加酶量、酶解溫度、酶解pH和時間4因 素設計正交試驗,以確定酶解瓜爾膠制備半乳甘露低 聚糖的最佳條件。正交試驗因素及水平見表2,正交試驗結 果見表3„根據正交結果分析,PH對酶解率的影響最大,其 次是加酶M,反應時間和溫度對酶解率率的影響相對較小。 酶法制備瓜爾膠半乳甘露低聚糖的研究,酶解的最佳條件為A2B3C2D2,即瓜爾膠濃度0.5%,加酶量 20 IU/g,pH 6.0,50 "C,反應時間8 h。由于此條件在正交 表中并未列人,故按此條件進行驗證[14],測得其酶解率為 24. 2% ,平均聚合度為4.13,優于正交表中的試驗值。
              酶解產物商效液相色譜定性分析
              分別取甘露糖和甘露二糖標準溶液以及酶解液進行髙 效液相色譜檢測,結果見圖2»
              圖2瓜爾肢酶解液高效液相色譜圖
              Figure 2 HPLC of guar gum hydrolysate
              124
              根據甘餺糖和甘霈二糖標準溶液的保留時間(分別是 3. 667和4. 234)分析,酶解產物中主要以二糖為主。
              3結論
              由于酶解反應可以在短時間內降低瓜爾膠的黏度,因此 在工業生產上,可以采用批量添加瓜爾膠的方式,從而獲得 高濃度的水解液。在單因素試驗基礎上,通過正交試驗確定 酶解制備半乳甘露低聚糖的最佳反應條件為瓜爾膠濃度 0.5%,加酶量20 IU/g,pH 6.0,50 *0,反應時間8 h•在此 條件下,酶解率為24. 2%,平均聚合度為4. 13。經HPLC定 性檢測,瓜爾膠酶法制備的半乳甘露低聚糖以二糖為主。
              本文推薦企業:山東東達生物化工有限公司(http://www.semangattanpabatas.com/),是專業的瓜爾膠和瓜爾豆膠生產廠家,專業生產瓜爾膠和瓜爾豆膠。擁有雄厚的技術力量,先進的生產工藝和設備。山東東達生物化工有限公司全體員工為海內外用戶提供高技術,高性能,高質量的瓜爾膠和瓜爾豆膠產品。熱忱歡迎國內外廣大客戶合作共贏。
               
              农村老熟妇乱子伦视频
              <video id="fxlpn"></video>

                <listing id="fxlpn"><font id="fxlpn"></font></listing>
                <sub id="fxlpn"><delect id="fxlpn"><font id="fxlpn"></font></delect></sub>

                  <mark id="fxlpn"></mark>
                  <delect id="fxlpn"><dfn id="fxlpn"></dfn></delect>
                  <address id="fxlpn"></address>

                        <sub id="fxlpn"></sub>

                        <progress id="fxlpn"><nobr id="fxlpn"><meter id="fxlpn"></meter></nobr></progress>

                          <thead id="fxlpn"></thead>